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极威生物ELIASA试剂盒实验操作原理及注意事项
阅读次数:1481次 发布时间:2022/8/2 16:03:47
ELISA试剂盒的操作方法*常用的是双抗夹心法,双抗体夹心法原理主要是:固相载体上包被抗体,再加入待测抗原(可以是血清或者其它样本),洗板(洗掉非特异性吸附),再加入酶标抗体,再洗板(洗掉非特异性吸附),再加底物显色。
在操作过程中有几点需要注意:
①抗原是大分子抗原,具有2个以上的抗原表位;
②包被抗体和酶标记的抗体都是针对抗原的特异性抗体,只不过它们分别针对的是不同抗原表位,经常被称作一抗和二抗;
③酶是催化底物显色的,起到一个信号放大作用。
ELISA试剂盒具体操作步骤如下:
1)将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2)加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
3)加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻di洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
4)加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。
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