主要用途

细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂是一种旨在使用特异性合成底物磷脂酰肌醇-3 ,4 ,5-三磷酸（PIP3），在PTEN去磷酸化后，释放出游离磷酸根，与孔雀绿染料发生显色反应后，采用比色法测定其峰值的变化，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细胞裂解悬液样品的PTEN活性及其抑制剂的检测。广泛应用于细胞凋亡、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。

技术背景

细胞张力蛋白同源在10号染色体缺失性磷酸酶（phosphatase ａnd tensin homolog deleted on chromosome ten；PTEN；EC3.1.3.67），又称为多发性晚期肿瘤突变基因1（mutated in multiple advanced cancers 1；MMAC1），是一个肿瘤抑制基因，位于染色体10q23.3，转录产物515kb，蛋白产物175氨基酸。PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能区和约175个氨基酸左右的与骨架蛋白张力蛋白（tenasin）、辅助蛋白（auxilin）同源的区域，是一种双重特异性磷酸酶，能使酪氨酸、丝氨酸、苏氨酸、磷酯酰肌醇（phosphoinositide）等去磷酸化。PTEN具有调节细胞周期、防止细胞过度生长和分裂、参与细胞凋亡、粘附、迁移、浸润，控制细胞内磷脂酰肌醇-3 ,4 ,5-三磷酸（Phosphatidylinositol-3,4,5- trisphosphate；PIP3）水平，调控Akt/PKB信号通路等功能。PTEN基因突变和缺失将导致肿瘤发生、发展和转移，以及多发性错构瘤综合征（Cowden syndrome）等。基于底物磷脂酰肌醇-3 ,4 ,5-三磷酸，在PTEN的催化下，水解产生磷脂酰肌醇-4 ,5-二磷酸（PIP2），同时释放出游离磷酸根，进而与孔雀绿染料发生显色反应产生其峰值的变化（660nm波长），以此测算PTEN的活性。 

注意事项

1． 本产品为25次操作，包括5次标准测定

2． 操作时，避免污染母液

3． 操作时，须戴手套

4． 终止液（Reagent F）和显色液（Reagent G）具有腐蚀性，避免直接用手接触

5． 样品切忌使用磷酸缓冲液和脱氧胆酸纳处理

6． 如果使用96孔板测定，建议反应孵育时，置于平式摇荡仪摇荡孵育，速度为50RPM

7． 比色测定后，比色皿须清洗彻di

8． 如果用户没有660nm波长，可以使用600至660nm的任一波长替代

9． 显示绿色表明具有较强酶活性

10． 空白对照读数应小于0.2

11． 建议待测样本蛋白浓度为100微克/5微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量； （本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－G&VS30030.1）

12． PTEN活性单位浓度定义：在37℃温度下，pH 8.0的情况下，每单位酶在单位时间内（每分钟）释放1微摩尔的磷

13． 本公司提供系列磷酸化酶检测试剂产品

质量标准

1． 本产品经鉴定性能稳定

2． 本产品经鉴定检测准确

使用承nuo

极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承nuo”的宗旨为我们的用户提供优zhi产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保zheng说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒

IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息

单组份订购信息

编号名称规格

G&VS50064.1细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂盒20次

G&VS50064.1A清理液（Reagent A）   500毫升

G&VS50064.1B 裂解液（Reagent B）    100毫升

G&VS50064.1C缓冲液（Reagent C）   10毫升

G&VS50064.1D 阴性液（Reagent D）    10毫升

G&VS50064.1E 反应液（Reagent E）     1毫升

G&VS50064.1F终止液（Reagent F）10毫升

G&VS50064.1G 显色液（Reagent G）10毫升

G&VS50064.1H 标准液（Reagent H）5毫升

G&VS30030.1 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒 200次

试剂盒订购信息

原创作者：上海极威生物科技有限公司