人Progranulin（PGRN）ELISA检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人Progranulin（PGRN）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并che底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人Progranulin（PGRN）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。【注意事项】 

1．试剂盒使用前请保存在2-8℃。除复溶后的标准品，其他成分不可冻结。

2．浓缩生物素化人IL-2抗体，浓缩酶结合物体积小，运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000rpm离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。

3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，使结晶wan全溶解后再配制洗涤液。

4．测试过程中，人IL-2冻干标准品为一次性使用，不得分装。因其浓度较低，溶解两小时候后，会迅速失活。

5．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。

6．配制试剂时，要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂，充分混匀对测试结果尤为重要，zui好使用微量振荡器(使用zui低频率)，如无微量振荡器，可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟，例如做圆周动作，使加入孔中的反应液混匀。

7．实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作，并在使用前充分预热。

8．酶免试验中人IL-2标准品和样本检测时建议作复孔。

9．将不用的微孔板放进原铝箔袋中，置2-8℃保存。

10．显色液对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。

11．超过使用有效日期的试剂盒不能应用于实验中。

12．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，波长应该设置为450nm和630nm.

13．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸，使用时必须注意安全。

14．各步骤加样均应使用加样器，并经常校准其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

15．每次试验测定的同时做标准曲线，zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔zui高浓度的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。

16．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

17．以洗板机洗板时,每孔注液量不应少于350μl, 注意检查加样头是否堵塞。手工洗板时, 用带纸屑的吸水材料应慎重, 防止外源性过氧化物酶类似物或氧化还原物与显色剂发生反应。

18．用终止液终止反应后，请于10分钟内读取OD值。

19．进行复孔实验时，结果计算一定要求平均值。

20．标本溶血可能会有假阳性结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

21．试验时，应该将加过样品的板条放于密闭盒内，并保持湿度约60%左右。

22．为bao证恒温箱内的温度为37℃，恒温箱的温度要经常校准。以确保实验温度保持恒定。

23．48T的试剂盒，所有组分均为96T的50%的量。

原创作者：上海极威生物科技有限公司