人C肽（C-P）ELISA检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人C肽（C-P）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并che底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人C肽（C-P）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

需要而未提供的试剂和器材

1. 酶标仪(450nm检测波长滤光片，570nm或630nm校正波长滤光片) 。

2. 洗板机（可调注液量，bao证每孔洗液加至0.35ml而不溢出）。

3. 超净工作台，生物安全柜，通风柜。

4. 高精度单道加液器（量程为0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).

5. 高精度多道加液器（8道或12道，量程为50-300μl).

6. 37℃恒温箱。

7. 低温离心机。

8. 电冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.

9.  漩涡混合仪，低频振荡器等

注意事项

1． 从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

3． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

4． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

5． 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

6.   所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸，使用时必须注意安全。

7.  各步骤加样均应使用加样器，并经常校准其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

8.  每次试验测定的同时做标准曲线，。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔zui高浓度的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n）。

9.  配制试剂时，要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂，充分混匀对测试结果尤为重要，zui好使用微量振荡器(使用zui低频率)，如无微量振荡器，可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟，例如做圆周动作，使加入孔中的反应液混匀。

10.  实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作，并在使用前充分预热。

11.  手工洗板应注意：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

原创作者：上海极威生物科技有限公司