技术文章
准备做ELISA的血样标本该怎么保存?
阅读次数:4030次 发布时间:2019/4/12 11:53:04
一、样本若是测血浆,可以将收集的样本置于含EDTA的LV管中,立即轻摇几次防止凝固,然后将血样转移到含抑肽酶(0.6TIU/ml血样)的离心管中,轻摇混匀,来抑制样本中蛋白酶的活性,防止您所测定的物质降解。4度离心1600g,15分钟,收集血浆,-70度保存,半年的时间可以。
二、若是测定血清,离体的样本(我们的做法)中加抑肽酶浓度同血浆的提取,室温条件下过夜,取上清,然后离心再取上清。-70度保存可用半年。
在这个过程中需要注意的是若ELISA系统中用HRP显色,则禁止使用叠氮钠,因为其抑制酶的活性;还有就是样本不能反复冻溶,否则效价很快下降。
下面,我们列了一个详细的各类样品保存方法,供大家参考:
标本的采集及保存
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:
1.极威生物公司只负责试剂盒本身,而不包括准备检测的样品。用户应计算在整个试验中需要使用的样品的总量。请提前准备足够的样本。
2.以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月。
3.如果样本种类在实验手册中没有提到,一般需要做预实验以确定试剂盒能被用来检测您的样品。
4.用于组织或细胞裂解的化学裂解液中的某些化学物质可能会影响ELISA实验结果。
5.由于其他来源的抗原可能和本公司试剂盒中使用的抗体不匹配(例如,抗体的目标,是构象表位而不是线性表位),其他一些制造商的非重组或重组蛋白可能无法被本公司试剂盒所识别。
6.由于包括细胞活力,细胞数量,以及采样时间等因素,从细胞培养上清液提取的样品,可能无法被检测。
7.建议采用新鲜样品来检测,不要存放时间过长。否则,蛋白质降解和变性可能发生,*终导致错误的结果。
8.标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
原创作者:上海极威生物科技有限公司
联系人:陈经理(在阿仪网上看到的)
电 话:15214379366
手 机:16602115336
Q Q:435399850
传 真:021-80186165
邮 箱:435399850@qq.com
地 址:上海市崇明县长兴镇潘园公路1800号2号楼9703室