（酶联免疫法）说明书

游离三碘甲腺原氨酸定量测定试剂盒-说明/价格-GIVEI生物 【产品名称】

中文名称： 游离三碘甲腺原氨酸定量测定试剂盒 （酶联免疫法）

英文名称：Quantitative Diagnostic Kit for free 3,5,3’-triiodothyronine（ELISA）

游离三碘甲腺原氨酸定量测定试剂盒-说明/价格-GIVEI生物 【型号规格】

本试剂盒为96T/盒

游离三碘甲腺原氨酸定量测定试剂盒-说明/价格-GIVEI生物 【预期用途】

本试剂盒用于体外实验测定犬血清中游离3,5,3’-三碘甲腺原氨酸（FT₃）的含量

犬中甲状腺合成和分泌的T₃、T₄是控制犬代谢的主要内分泌激素，在血液循环中绝大部分T₃、T₄是以结合状态存在的，只有少部分T₃、T₄以游离状态存在，但真正能够发挥生物活性的是游离部分，（游离T₃占总T₃的0.3%，游离T₄占总T₄的0.03%左右）,测定游离部分更能反映甲状腺功能状态的真正水平。

本试剂盒适用于各种酶标仪。

游离三碘甲腺原氨酸定量测定试剂盒-说明/价格-GIVEI生物 【试验原理】

    试剂盒采用酶联免疫分析方法。生物素标记合成的T₃ 类似物，它的主要特点是在免疫反应中，不与TBG结合，又具有与甲状腺抗原相同的抗原性，在竟争抑制反应中，定量的抗体与生物素标记的T₃ 类似物及非标记抗原（校准品或标本）进行竟争反应，抗体与生物素标记合成的T₃ 类似物结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多，抗体与生物素标记合成的T₃ 类似物结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化T₃ 类似物，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化T₃ 类似物-HRP-亲和素的复合物。经加底物显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。随着FT₃浓度的升高，OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对血清中FT₃的减少或升高有可靠的检出性能。

【主要组成成份】

FT₃校准品浓度；

各组份应在使用充分摇匀。

【储存条件及有效期】试剂盒保存于2～8℃。有效期为十二月，请在试剂盒标注的“有效期至”日期内使用。

微孔板打开后应置有干燥剂的封口袋中密封防潮保存。

【适用仪器】各种型号酶标仪，必配450nm滤光片，选配600-630nm滤光片。

【样本要求】取血样后分离血清，2~8℃保存不超过48小时，长期保存可冻存于-20℃。

【试验方法】

1、 将各种试剂移至室温（18~25℃）平衡半小时，取浓缩洗涤液，根据当批检测数量，用蒸馏水1：20稀释，混匀后备用。

2、 将预包被板从密封袋中取出，设个空白对照孔，不加任何液体；每个校准品设2孔；除空白孔外所有孔加入生物素化抗原50ml，混匀，贴上不干胶封片，置37℃温育60分钟。

3、 手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10甩干，重复3次后拍干。              

    洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。

4、 每孔加入酶标亲和素50ml（空白对照孔除外），混匀，贴上不干胶封片，置37℃温育30分钟。

5、 手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10甩干，重复3次后拍干。              

    洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。

6、 每孔加显色剂A 50ml，显色剂B 50ml，振荡混匀后，置37℃避光显色15分钟，每孔加终止液50ml。

7、 用酶标仪读数，单波长酶标仪需先用空白对照孔调零点，然后测定各孔吸光值。

【对试验结果的解释】

    实验数据的处理：以各校准品的OD值为纵轴（log对数坐标）,浓度为横轴(log对数坐标),在对数坐标纸上绘制标准曲线,在标准曲线上查出待测标本的FT3含量(pmol/l)。或用电脑拟合双对数直线回归方程式，根据样品的OD值，计算出样品的浓度。方程式为:log[OD]=Blog[浓度]+A

【产品性能指标】

1、灵敏度：≤ 2.0 pmol/l

2、精密度：变异系数CV≤15%

3、剂量反应曲线线性：不低于0.980

4、交叉反应

【注意事项】

1、试剂盒宜存放于2～8℃。

2、预包被板须密封防潮。

3、做实验必须将试剂盒恢复至室温（18~25℃），加试剂应先摇匀，加样中应避免交叉污染。

4、温育反应过程中必须贴粘胶板。

5、不同批号试剂不能混用。

6、试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验。

原创作者：上海极威生物科技有限公司