（酶联免疫法）说明书

【产品名称】

通用名称：甲状腺素定量测定试剂盒(酶联免疫法)

英文名称：Quantitative Diagnostic Kit for Thyroxine  (ELISA)

【包装规格】

本试剂盒为48T/盒

甲状腺素定量测定试剂盒Elisa说明书-介绍/价格-GIVEI生物 
【预期用途】

本试剂盒用于定量测定犬血清中甲状腺素含量。

甲状腺是主要的分泌激素腺体之，能分泌甲状腺素（T4）和三碘甲腺原氨酸（T3）。血液循环系统甲状腺激素的水平，常常反映甲状腺的功能,因此测定血清总T4含量能较正确地判断甲状腺的功能状态。从判断甲状腺功能而言，T4仍然是目常用的检查指标，在检查甲状腺功能低下时，血清T4含量是好的单项指标，与T4联合使用是当判断先天性甲低的唯方法。

甲状腺素定量测定试剂盒Elisa说明书-介绍/价格-GIVEI生物 
【检验原理】

试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记T₄，纯化的抗T₄抗体包被微孔板，在竟争抑制反应中，定量的固相抗体与生物素标记T₄及非标记抗原（校准品或标本）进行抑制竟争反应，抗体与生物素标记的T₄结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多,抗体与生物素标记的T₄结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化T₄，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化T₄ -HRP-亲和素复合物。经加底物显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。随着T₄浓度的升高，OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对血清中T₄的减少或升高有可靠的检出性能。

甲状腺素定量测定试剂盒Elisa说明书-介绍/价格-GIVEI生物 
【主要组成成份】

T₄校准品浓度；

各组份应在使用充分摇匀。

【储存条件及有效期】试剂盒保存于2～8℃。有效期为12月，请在试剂盒标注的“有效期至”日期内使用。

微孔板打开后应置有干燥剂的封口袋中密封防潮保存。

【适用仪器】各种型号酶标仪，必配450nm滤光片，选配600-630nm滤光片。

【样本要求】取血样后分离血清，2~8℃保存不超过48小时，长期保存可冻存于-20℃。

【检验方法】

1、将各种试剂移至室温（18~25℃）平衡半小时，取浓缩洗涤液，根据当批检测数量，用蒸馏水1：20稀释，混匀后备用。

2、将预包被板从密封袋中取出，设个空白对照孔，不加任何液体；每个校准品设2孔；除空白孔外所有孔加入生物素化抗原50ul，混匀，贴上不干胶封片，置37℃温育60分钟。

3、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10甩干，重复3次后拍干。              

洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。

4、每孔加入酶标亲和素50ul（空白对照孔除外），混匀，贴上不干胶封片，置37℃温育30分钟。

5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10甩干，重复3次后拍干。              

洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。

6、每孔加显色剂A 50ul，显色剂B 50ul，振荡混匀后，置37℃避光显色15分钟，每孔加终止液50ul。

7、用酶标仪读数，取波长450nm，先用空白孔调零点，然后测定各孔光密度值（OD值）。

【检验结果的解释】

     实验数据的处理：以各校准品的OD值为纵轴（log对数坐标）,浓度为横轴(log对数坐标),在对数坐标纸上绘制标准曲线,在标准曲线上查出待测标本的T4含量(ng/ml)。或用电脑拟合双对数直线回归方程式，根据样品的OD值，计算出样品的浓度。方程式为:log[OD]=Blog[浓度]+A

【检验方法的局限性】

样本严重溶血可能会影响检测结果。

【产品性能指标】

1、空白检测限：不大于20 ng/ml (25.6nmol/L)

2、精密度：批内CV≤15%，批间CV≤15%。

3、剂量-反应曲线的线性(∣r∣)：不低于0.990

4、特异性：配制高浓度T₃溶液，测量结果应符合下表。

【注意事项】

1、试剂盒宜存放于2～8℃。

2、预包被板须密封防潮。

3、做实验必须将试剂盒恢复至室温（18~25℃），加试剂应先摇匀，加样中应避免交叉污染。

4、温育反应过程中必须贴粘胶板。

5、不同批号试剂不能混用。

6、试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验。

原创作者：上海极威生物科技有限公司