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人正常乳腺细胞Hs 578Bst-价格/说明-极威生物

阅读次数：3595次　发布时间：2021/1/16 21:58:25

细胞名称人正常乳腺细胞 Hs578Bst

动物种别人

细胞数量 1X10^6

培养瓶规格 25T

传代次数 2-3 代

稳定传代次数 10-15 次

传代方式 1：2 或 1：3 传代

推荐培养方案 90%Hyclone DMEM 高糖培养基、10%Gibco 胎牛血清、1%-1.5%双抗

培养温度 37℃

二氧化碳浓度 5%

细胞纯度 ≥99%

支原体检测（-）

培养体系内毒素检测 ≤0.5EU/ml
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细胞处理注意事项

1、收到细胞，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。

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2、收到细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清. 刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右，血清浓度还是在 10％。

3、收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过 80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

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4、24 小时后，细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入 37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心 1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，般传二，如细胞量多可传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。

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5、贴壁细胞，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。