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Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)-价格/说明-极威生物

阅读次数：2545次　发布时间：2021/1/18 20:17:05

Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)-价格/说明-威生物

Cell Counting Kit-8

产品编号产品名称包装

C0038 Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒) 500次

产品简介：

 Cell Counting Kit-8，简称CCK-8试剂盒或CCK8试剂盒，是种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。

 WST-8是种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan (参考图1)。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

图1. WST-8检测原理图 (EC=electron coupling reagent，即电子耦合试剂)

 WST-8是MTT的种升替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。先，MTT被线粒体内的些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽，灵敏度更高。

 WST-8和WST-1相比，检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。

 本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或些药物诱导的细胞生长抑制检测。

 本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅管已经配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，无须再进行任何配制等操作。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解

formazan。可以用于大批量样品的检测。

 酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。

 WST-8对细胞无明显毒性。加入CCK-8溶液显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到佳测定时间。

 关于不同的细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择

 本试剂盒可以测定500个样品。

Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)-价格/说明-威生物
包装清单：

产品编号产品名称包装

C0038 CCK-8溶液 5ml

— 说明书 1份

保存条件：

4ºC避光保存年有效，-20ºC避光保存两年有效。

注意事项：

 由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，定要注意蒸发问题。方面，由于96孔板周围圈容易蒸发，可以采取弃用周围圈的办法，改加相同量的PBS、水或培养液；另方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。

 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，所以还原剂(例如些抗氧化剂)会干扰检测，如果待检测体系中存在较多的还原剂，需设法去除。 用酶标仪检测需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。

 本产品仅限于业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴次性手套操作。

Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)-价格/说明-威生物
使用说明：

1. 通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素决定)。按照实验需要，进行培养并给予0-10微升特定的药物刺激。

2. 每孔加入10微升CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200微升，则需加入20微升CCK-8溶液，其它情况以此类推。可以用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。如果担心所使用的药物会干扰检测，需设置加了相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。

3. 在细胞培养箱内继续孵育0.5-4小时，对于大多数情况孵育1小时就可以了。时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，初次实验时可以在0.5、1、2和4小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的个时间点用于后续实验。

4. 在450nm测定吸光度。如无450nm滤光片，可以使用420-480nm的滤光片。可以使用大于600nm的波长，例如650nm，作为参考波长进行双波长测定。

常见问题：

1. CCK-8溶液对细胞的毒性大小如何？

CCK-8溶液对细胞的毒性非常低，通常观察不到细胞毒性。细胞在CCK-8法检测后仍然可以正常生长，并可以用于其它的细胞实验。但为了避免CCK-8溶液可能带来的对于后续检测的影响，除非该细胞难获得，否则不推荐把CCK-8溶液孵育过的细胞用于其它实验。

2. 如果吸光度值太低，可以采取什么办法？

a. 适当增加细胞数量。

b. 延长加入CCK-8试剂后的孵育时间。