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细胞ERK1/2激酶总活性光度法定量检测试剂盒的实验步骤 极威生物
阅读次数:808次 发布时间:2021/6/24 14:28:44
细胞ERK1/2激酶总活性光度法定量检测试剂盒的实验步骤 极威生物
一、 待测样品准备
1. 准备好75cm2细胞培养瓶或100mm细胞培养皿的待测培养细胞(1至5 X 107细胞)
2. 小心加入3毫升清理液(Reagent A),覆盖生长表面
3. 小心抽去清理液
4. 使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞(注意:避免使用胰酶消化)
5. 加入3毫升清理液(Reagent A),混匀细胞
6. 移入到预冷的15毫升锥形离心管(注意:悬浮细胞从这一步骤开始)
7. 放进4℃台式离心机离心5分钟,速度为300g
8. 小心抽去上清液
9. 加入100至500微升裂解液(Reagent B),充分混匀(注意:可以调节蛋白浓度)
10. 转移到预冷的1.5毫升离心管
11. 强力涡旋震荡15秒
12. 置于冰槽里孵育30分钟
13. 放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415)
14. 小心移取100至500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管
15. 移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-GMS30030.1)
16. 即刻放进-70℃保存或置于冰槽里继续后续操作
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您好!上海极威生物科技有限公司(Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.)成立于上海,是一家专业从事“产品研发、市场销售、技术服务”为一体的高科技生物技术公司。极威生物依托国内外技术研发人才的优势,由留美资深科学家与数位国内多年从事生物领域研究的博士、硕士等高校生物领域研究人员共同创立,在科学研究和医疗检测领域享有极高的声誉,经过多年的努力发展已成为专业供应各类生物科研用品的公司,长期专注于生物领域,旗下产品种类众多。极威生物秉承以产品质量为根本,以市场需求为导向,以为客户创造价值为己任的精神,致力于发展中国的科研事业。力求为我国生物科技事业提供更好的、更专业性的技术服务和科研产品。自公司成立以来,公司的销售额保持高速增长,企业规模不断扩大,研发产品包括elisa试剂盒,生化试剂盒,动物血制品,抗体,标准品,生化试剂,实验耗材等10万余种类,公司长期致力于elisa试剂盒、生化试剂盒的研发,为客户提供生化试剂盒、ELISA试剂盒、技术服务等一系列实验代测服务。
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