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细胞ERK1/2激酶总活性光度法定量检测试剂盒的测定准备 极威生物

阅读次数:760次  发布时间:2021/6/24 14:33:03

 一、细胞ERK1/2激酶总活性光度法定量检测试剂盒测定准备

1准备好待测样品(例如细胞裂解悬液等),置于冰槽里 

2设定好分光光度仪(温度为30℃):波长为340nm,间隔1分钟,读数6次(共5分钟),并置零

3缓冲液(Reagent C室温下均衡温度

 

二、背景对照测定

1移取130微升缓冲液(Reagent C到新的比色皿

2加入20微升酶促液(Reagent D

3加入20微升反应液(Reagent E

4加入20微升底物液(Reagent F

5放进30培养箱里静置3分钟

6加入10微升阴性液(Reagent G

7上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

8即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照:340波长读数0分钟 340波长读数5分钟 

 

三、样品总活性测定

1移取130微升缓冲液(Reagent C到新的比色皿

2加入20微升酶促液(Reagent D

3加入20微升反应液(Reagent E

4加入20微升底物液(Reagent F

5放进30培养箱里静置3分钟

6加入10微升待测样品(注意:100微克细胞裂解蛋白;样品须溶解

7上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

8即刻放进分光光度仪检测,此为样品总活性读数:340波长读数0分钟 340波长读数5分钟 

 

四、样品非特异活性测定

检测开始前,移取20微升缓冲液(Reagent C1.5毫升离心管,分别加入10微升专性液(Reagent H待测样品(注意:100微克细胞裂解蛋白),混匀后,放进30培养箱里孵育30分钟。然后继续下列操作。

1移取100微升缓冲液(Reagent C到新的比色皿

2加入20微升酶促液(Reagent D

3加入20微升反应液(Reagent E

4加入20微升底物液(Reagent F 

5放进30培养箱里静置3分钟

6加入40微升上述预处理的待测样品

7上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

8即刻放进分光光度仪检测,此为样品非特异活性读数:340波长读数0分钟 340波长读数5分钟

 

 

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    您好!上海极威生物科技有限公司(Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.成立于上海是一家专业从事“产品研发、市场销售、技术服务”为一体的高科技生物技术公司。极威生物依托国内外技术研发人才的优势,由留美资深科学家与数位国内多年从事生物领域研究的博士、硕士等高校生物领域研究人员共同创立,在科学研究和医疗检测领域享有极高的声誉,经过年的努力发展已成为专业供应各类生物科研用品的公司,长期专注于生物领域,旗下产品种类众多。极威生物秉承以产品质量为根本,以市场需求为导向,以为客户创造价值为己任的精神,致力于发展中国的科研事业。力求为我国生物科技事业提供更好的更专业性的技术服务和科研产品自公司成立以来,公司的销售额保持高速增长,企业规模不断扩大,研发产品包括elisa试剂盒,生化试剂盒,动物血制品,抗体,标准品,生化试剂实验耗材等10万余种类,公司长期致力于elisa试剂盒、生化试剂盒的研发,为客户提供生化试剂盒、ELISA试剂盒、技术服务等一系列实验代测服务。

 

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